RT-PCR是檢測新型冠狀病毒核酸最廣泛、最準確的篩選和確認方法。大規(guī)模的核酸檢測將不可避免地引起相關(guān)機構(gòu)和單位重視建立標準化的臨床PCR實驗室。相關(guān)建設(shè)問題可咨詢020-29038089。
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一、新冠核酸檢測PCR實驗室建設(shè)依據(jù)
新型冠狀病毒實驗室生物安全指南（第二版）
GB19489-2008《實驗室生物安全通用要求》
GB50346-2011《生物安全實驗室建筑技術(shù)規(guī)范》
WS233-2017《病原微生物實驗室生物安全通用準則》
《臨床基因擴增實驗室管理暫行辦法》衛(wèi)生部
《醫(yī)療機構(gòu)臨床基因擴增檢驗實驗室管理辦法》衛(wèi)辦醫(yī)政發(fā)【2010】194號
《醫(yī)療機構(gòu)臨床基因擴增檢驗實驗室工作導(dǎo)則》
二、初步了解PCR實驗室
如何避免污染是臨床基因擴增實驗室設(shè)計的關(guān)鍵問題。因此，實驗室的布局、空調(diào)通風系統(tǒng)設(shè)計、風量控制等都是圍繞這一核心問題展開的。
（1）現(xiàn)場要求高。需要標準的四區(qū)分離和氣流控制：試劑制備、樣品制備、PCR擴增檢測和擴增產(chǎn)物檢測。每個獨立的實驗區(qū)都有一個緩沖區(qū)。同時，每個區(qū)域均采用氣壓調(diào)節(jié)，使試劑和樣品在整個PCR實驗過程中不受氣溶膠污染，減少擴增產(chǎn)物對人和環(huán)境的污染。機械連鎖不銹鋼傳遞窗確保試劑和樣品在轉(zhuǎn)移過程中不受污染（人員分流）。
（2）人員要求高。進入PCR實驗室，需要接受基礎(chǔ)理論、實驗原理、標準操作、質(zhì)量保證、注意事項等方面的標準培訓(xùn)，并取得PCR工作證。
（3）高檢測風險。在檢測過程中，由于樣品蓋的打開、核酸提取的振動和離心作用，可能產(chǎn)生氣溶膠，存在感染的風險。
（4）防護要求高。個人防護必須按照生物安全三級實驗室的個人防護要求進行。
三、新冠核酸檢測實驗室設(shè)計參數(shù)（供參考）
| 區(qū)域 | 潔凈度等級 | 最小換氣次數(shù)（次/小時） | 與室外方向上相鄰相通房間最小壓差（Pa） | 溫度（℃） | 相對濕度（%） | 風速（m/s） | 噪聲dB（A） |
| 試劑儲存和準備區(qū) | 8 | 12 | +10 | 18~26 | 40-60 | ≤0.15 | ＜60 |
| 樣本制備區(qū) | 8 | 15 | -10 | 18~26 | 40-60 | ≤0.15 | ＜60 |
| 核酸擴增區(qū) | 8 | 15 | -15 | 18~26 | 40-60 | ≤0.15 | ＜60 |
| 產(chǎn)物分析區(qū) | 8 | 15 | -20 | 18~26 | 40-60 | ≤0.15 | ＜60 |
| 緩沖間 | - | 6 | 0 | 18~26 | 40-60 | —— | ＜60 |
| PCR專用走廊 | - | 6 | 5 | 18~26 | 40-60 | —— | ＜60 |
四、 新冠核酸檢測實驗室建設(shè)的幾個關(guān)鍵點
（1）平面布局：不論是組合式還是分散式布置的PCR實驗室，各功能房間均宜設(shè)置獨立緩沖間
（2）區(qū)域空氣流向：為避免交叉污染，PCR實驗室空氣流向必須嚴格遵循單一方向進行，即只能從試劑貯存和準備區(qū)→標本制備區(qū)→擴增反應(yīng)混合物配制和擴增區(qū)→擴增產(chǎn)物分析區(qū)。
（3）通風空調(diào)：為避免交叉污染，各功能用房內(nèi)空氣不能摻混?；旌鲜絇CR實驗室應(yīng)采用新風直流空調(diào)系統(tǒng)，當采用新風系統(tǒng)有困難時，各區(qū)域的空氣只能在自己的房間內(nèi)循環(huán)。
（4）生物安全：按照新型冠狀病毒實驗室生物安全指南（第二版）的規(guī)定，2019-nCoV病原體暫按照第二類病原微生物進行管理，則樣本植被區(qū)宜為負壓或加強型P2實驗室，核酸操作應(yīng)在生物安全柜內(nèi)進行。
關(guān)鍵技術(shù)措施包括：
*絕對負壓（避免室內(nèi)潛在污染外泄）
*氣流組織（室內(nèi)定向流，從低污染風險區(qū)流向高污染風險區(qū)）
*排風無害化處理（高效過濾、高空排放）
五、新冠核酸檢測實驗室氣流組織建議
（1）氣流組織宜采用上送下排，送風口和排風口布置應(yīng)使室內(nèi)氣流停滯的空間降低到最小程度。
（2）在生物安全柜操作面或其他有氣溶膠操作地點的上方附件不得設(shè)送風口
（3）高效過濾器排風口應(yīng)設(shè)在室內(nèi)被污染風險最高的區(qū)域，單向布置，不得有障礙；
（4）不能以回（排）風夾墻代替排風直管，排風高效過濾裝置與排風總管的連接必須全部是實體風管。
六、新冠核酸檢測實驗室裝飾裝修
核酸檢測實驗室有設(shè)計理念、裝修要求、凈化空調(diào)系統(tǒng)、通風、自控、工藝設(shè)備等幾個關(guān)鍵點。
要求：
1.墻面：光潔、不產(chǎn)塵積塵、耐腐蝕，易清潔消毒、無縫隙；
2.地面：防靜電、耐腐蝕、無縫隙、無滲漏；
3.陰陽角：均用圓弧角密封處理；
4.門：必須設(shè)置自動互鎖(機械或電子)；
1.避免交叉污染，采用全新風空調(diào)系統(tǒng)；
2.樣品制備區(qū)嚴格按照BSL-2設(shè)計施工；
3.排風系統(tǒng)全部按照要求采用高效過濾器凈化；
4.氣流組織：采用上送下排形式；
5.壓力梯度控制通過微壓差計及精密自控系統(tǒng)控制；
6.實驗室入口處顯示房間內(nèi)各項指標參數(shù)，并設(shè)置偏離報警；
工藝設(shè)備
1.實驗臺下部均留空，無死角；
2.全部采用不銹鋼304制作；
3.樣品制備區(qū)生物安全柜：BSC-||-B2型；
4.樣品制備區(qū)設(shè)置洗眼裝置，必要時應(yīng)有應(yīng)急噴淋裝置；
5.非接觸式操作理念(感應(yīng)式水龍頭、感應(yīng)式自動門、互鎖傳遞窗等)；
實驗室建設(shè)涉及到材料選擇、穩(wěn)定性、精度控制等多個技術(shù)和知識領(lǐng)域。不同的實驗室由于試驗樣品和試驗方法的不同，對實驗室建設(shè)有不同的要求?？梢哉f有很多不同之處。一個完善的實驗室在分析檢測中起著重要的作用，對保證實驗室工作人員的健康也起著重要的作用。
